خرید بررسی اثر عصاره برگ زیتون و ترکیب اصلی آن(اولئوروپئین) بر سمیت سلولی ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین در سلول های PC12

پژوهشگر گرامی،شما با عنوان بررسی اثر عصاره برگ زیتون و ترکیب اصلی آن(اولئوروپئین) بر سمیت سلولی ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین در سلول های PC12 وارد وب سایت شده اید برای دریافت فایل می توانید به ادامه مطلب بروید.
کلمات کلیدی:عصاره برگ زیتون,اولئوروپئین, سمیت سلولی , آپوپتوز, 6هیدروکسی دوپامین,سلولهای PC12,مقاله,پژوهش,تحقیق,پروژه,دانلود مقاله,دانلود پژوهش,دانلود تحقیق,دانلود پروژه

بیماری پارکینسون یک اختلال تخریب کننده نورونی شدید و پیش رونده سیستم عصبی مرکزی است که یکی از شایع ترین اختلالات حرکتی می­باشد. برای اکثر بیماری‌های تخریب کننده عصبی اقدامات موجود حکم مسکن را دارند. به علت اینکه شواهد متعددی پیشنهاد می­کنندکه دربسیاری از بیماری‌های تخریب کننده نورونی مرگ سلولی غیر عادی رخ می­دهد، داروهایی که بتوانند مرگ سلولی را متوقف کنند ممکن است از تخریب نورونی بیشتر جلوگیری کرده و پیشرفت بیماری را آهسته کنند. ترکیبات عمده عصاره برگ زیتون فنول هایی مانند اولئوروپئین می­باشند، که آثار ضد آپوپتوزی از خود نشان می­دهند بنابراین، مطالعه حاضر جهت بررسی اثر عصاره برگ زیتون و اولئوروپئین بر سمیت سلولی ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین بر روی سلول‌های PC12 به عنوان مدل in vitro بیماری پارکینسون طراحی شد. جهت القاء سمیت سلولی، سلول‌های PC12 با 150 میکرومول 6-هیدروکسی دوپامین تیمار شدند. در گروه­های درمانی دوزهای متفاوت برگ زیتون(g/mlμ600-100) واولئوروپئین(g/mlμ25-5) جهت بررسی اثر احتمالی محافظت کننده آنهااستفاده شد. سمیت سلولی توسط تست MTT تعیین شد. میزان ROS داخل سلولی توسط پروب فلورسنس دی­کلرو فلورسین دی استات از طریق روش فلوریمتری ارزیابی شد. قطعات DNA وپارامترهای بیوشیمیایی آپوپتوز (Bax Bcl2 و caspase3) به ترتیب توسط الکتروفورز در ژل آگارز و ایمونوبلاتینگ ارزیابی شدند. نتایج ما نشان دادند که افزایش 6-هیدروکسی دوپامین منجر به افزایش میزان آسیب سلولی، تولید ROS داخل سلولی، فعال شدن کاسپاز3، قطعه­قطعه شدن DNA و همچنین افزایش نسبت Bax/Bcl2 می­گردد. تیمار با عصاره برگ زیتون(μg/ml 400و600) و اولئوروپئین ( μg/ml20و25) اختلالات ذکر شده را کاهش می­دهد. روی هم رفته نتایج پیشنهاد می­کنند که عصاره برگ زیتون و اولئوروپئین در برابر آپوپتوز القاء شده در اثر 6-هیدروکسی دوپامین اثر محافظت کننده نورونی دارند. حداقل بخشی از این اثر محافظت کننده به واسطه کاهش آپوپتوز نورونی اعمال می­گردد و پیشنهاد کننده پتانسیل دارویی عصاره برگ زیتون و اولئوروپئین برای کاهش تخریب عصبی سلول­های دوپامینرژیک می‌باشد.

کلمات کلیدی:عصاره برگ زیتون، 6-هیدروکسی دوپامین، آپوپتوز، سلول­هایPC12، اولئوروپئین.

فهرست مطالب:

فصل اول... 1

1-1 معرفی بیماری پارکینسون. 2

1-2 فاکتورهای دخیل در بیماری پارکینسون. 4

1-2-1 افزایش سن.. 4

1-2-2 فاکتور های محیطی.. 4

1-3 سیستم یوبی کوئیتین پروتئوزوم 16

1-3-1 فاکتورهای ژنتیکی دخیل دربیماری پارکینسون. 17

1-4 التهاب عصبی و بیماری پارکینسون. 21

1-4-1 نقش فعال شدن گلیال ها در بیماری پارکینسون. 22

1-4-2 تغییرات ریز محیط ها در بیماری پارکینسون. 23

1-5 معرفی گیاه زیتون. 23

1-5-1 خصوصیات شیمیایی عصاره برگ زیتون. 24

1-6 اولئوروپئین به عنوان ترکیب اصلی برگ زیتون. 28

فصل دوم.. 30

2-1 مواد و روشها 31

2-1-1 وسایل مورد استفاده. 31

2-1-2 مواد و داروهای مورد استفاده. 31

2-1-3 بافرها و محلولهای مورد استفاده. 32

2-2 جمع آوری برگ زیتون. 34

2-3 تهیه عصاره برگ زیتون. 34

2-4 کشت سلول. 35

2-5 سنجش بقای سلولی. 35

2-5-1 MTT assay 35

2-6 سنجش ROS داخل سلولی. 37

2-6-1 گروه‌های مورد استفاده در تست ROS. 38

2-7 استخراج DNA از سلول‌های PC12 39

2-7-1 گروه‌های مورد آزمایش جهت استخراج DNA 40

2-8 الكتروفورز قطعات DNA.. 41

2-8-1 گروه‌های مورد آزمایش در وسترن بلات... 41

2-8-2 استخراج پروتئین از سلول‌های PC12 42

2-8-3 اندازه گیری کل پروتئین.. 43

2-8-4 بررسی میزان پروتئینهای درگیر در آپوپتوز (Bax Bcl-2 Caspase 3) با استفاده از روش وسترن بلات 44

2-8-5 الکتروفورز پروتئینها روی ژل SDS-PAGE.. 44

2-8-6 انتقال از ژل به کاغذ PVDF. 45

2-8-7 بلاکینگ 46

2-8-8 مرحله شستشو. 46

2-8-9 اضافه کردن آنتی بادی اولیه. 47

2-8-10 اضافه کردن آنتی بادی ثانویه. 47

2-8-11 افزودن سوبسترا و ثبت باندهای نورانی روی فیلم رادیولوژی.. 47

2-8-12 ظهور فیلم.. 48

2-8-13 زدودن آنتی بادیهای متصل به آنتی ژن از روی کاغذ و کنترل لودینگ نمونه ها 48

2-8-14 آنالیز تصاویر گرفته شده از باندهای پروتئینی.. 49

2-9 آنالیز آماری. 49

فصل سوم.. 50

3-1 نتایج. 51

3-1-1 بررسی تأثیرات غلظتهای متفاوت 6-هیدروکسی دوپامین بر بقای سلول‌های PC12. 51

3-1-2 بررسی اثرات دوزهای متفاوت عصاره بر سلول‌های PC12 52

3-1-3 بررسی اثرات دوزهای متفاوت اولئوروپئین بر سلول‌های PC12 53

3-1-4 بررسی اثرات دوزهای متفاوت عصاره برگ زیتون(OLE) بر بقای سلول‌های PC12کشت شده در حضور 6-هیدروکسی دوپامین.. 54

3-1-5 بررسی اثرات دوزهای متفاوت اولئوروپئین بر بقای سلول‌های PC12کشت شده در حضور 6-هیدروکسی دوپامین 55

3-1-6 بررسی اثرات دوزهای موثر عصاره برگ زیتون بر میزان تولید ROS داخل سلولی ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین 56

3-1-7 بررسی اثرات دوزهای موثر اولئوروپئین بر میزان تولید ROS داخل سلولی ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین 57

3-1-8 آنالیز نتایج به دست آمده از وسترن بلات برای پروتئینهای درگیر در آپوپتوز سلولی.. 58

3-1-9 بررسی اثرات عصاره برگ زیتون واولئوروپئین بر قطعه قطعه شدن DNA ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین 63

فصل چهارم.. 64

4-1 بحث و نتیجه گیری. 65

4-2 بروز استرس اکسیدایتو وآپوپتوز در بیماری پارکینسون. 65

4-3 عملکرد کانال های کلسیم و بیماری پارکینسون. 72

4-4 بروز التهاب نورونی در بیماری پارکینسون. 73

4-5 نتیجه گیری کلی. 76

4-6 پیشنهادها 77

فهرست اشکال:

شکل 1- 1:تولید گونه های واکنش پذیر اکسیژن د راثر پارکوات 8

شکل 1- 2: مکانسیم القاء سمیت عصبی توسط 6-هیدروکسی دوپامین.. 13

شکل 3- 1:بررسی اثر غلظت‌های متفاوت 6-هیدروکسی دوپامین بر بقای سلول‌های PC12 با استفاده از تست MTT 51

شکل 3- 2: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت عصاره برگ زیتون بر بقای سلول‌های PC12 با استفاده از تست MTT 52

شکل 3- 3: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت اولئوروپئین بر بقای سلول‌های PC12 با استفاده از تست MTT 53

شکل 3- 4: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت عصاره برگ زیتون بر بقای سلول‌های PC12 در حضور 6-هیدروکسی دوپامین با استفاده از تست MTT. 54

شکل 3- 5: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت اولئوروپئین بر بقای سلول‌های PC12 در حضور 6-هیدروکسی دوپامین با استفاده از تست MTT. 55

شکل 3- 6: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت عصاره برگ زیتون بر میزان ROS تولید شده در حضور 6-هیدروکسی دوپامین 56

شکل 3- 7: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت اولئوروپئین بر میزان ROS تولید شده در حضور 6-هیدروکسی دوپامین 57

شکل 3- 8: بررسی بیان کاسپاز 3 فعال شده در گروه‌های تیمار شده با 6-هیدروکسی دوپامین و عصاره برگ زیتون 59

شکل 3- 9: بررسی بیان کاسپاز 3 فعال شده در گروه‌های تیمار شده با 6-هیدروکسی دوپامین و اولئوروپئین 60

شکل3- 10: بررسی بیان نسبت Bax/Bcl-2 در گروه‌های تیمار شده با 6-هیدروکسی دوپامین و عصاره برگ زیتون 61

شکل3- 11: بررسی نسبت Bax/Bcl-2 در گروه‌های تیمار شده با 6-هیدروکسی دوپامین و اولئوروپئین 62

شکل3- 12:بررسی قطعه قطعه شدن DNA در حالت تیمار با 6-هیدروکسی دوپامین همراه با دوزهای موثر اولئوروپئین و عصاره برگ زیتون. 63

ادامه مطلب و دریافت فایل

تحقیق درباره شغل استاد دانشگاه:تحقیق در مورد شغل استاد دانشگاه,تحقیق در رابطه با شغل استاد دانشگاه,تحقیق با عنوان شغل استاد دانشگاه,تحقیق با موضوع شغل استاد دانشگاه,معرفی شغل استاد دانشگاه,وظایف استاد دانشگاه,مهارت و دانش مورد نیاز استاد دانشگاه,تحصیلات لازم و نحوه ورود به شغل استاد دانشگاه,بازارکار، درآمد و آینده شغلی استاد دانشگاه در ایران,شخصیت های مناسب استاد دان

مبانی نظری بهزیستی روان‌شناختی:دانلود مبانی نظری بهزیستی روان‌شناختی,مبانی نظری,پیشینه تحقیق,دانلود مبانی نظری,دانلود پیشینه تحقیق

مبانی نظری و پیشینه تحقیق جهاني شدن اقتصاد و رابطه مبادله:مبانی نظری و پیشینه تحقیق جهاني شدن اقتصاد و رابطه مبادله,مبانی نظری و پیشینه تحقیق, جهاني شدن اقتصاد و رابطه مبادله,مبانی نظری, پیشینه تحقیق, جهاني شدن اقتصاد, رابطه مبادله

پاورپوینت کاخ سلیمانیه کرج:کاخ سلیمانیه کرج,کاخ موزه سلیمانیه کرج,مجموعه کاخ سلیمانیه کرج ,پلان کاخ سلیمانیه کرج,پاورپوینت کاخ سلیمانیه کرج,پروژه کاخ سلیمانیه کرج,تحقیق,دانلود,ppt

دلایل کمبود آب در شهرستان کوهدشت، ارائه راهکارها و پیشنهادات:کمبود آب,شهرستان کوهدشت

مبانی نظری پیشینه تاریخی و جغرافیایی سیستان:مبانی نظری پیشینه تاریخی وجغرافیایی سیستان، ,مبانی نظری, پیشینه تاریخی وجغرافیایی سیستان،

پاورپوینت تاریخچه شهر و شهرنشینی در دوره باستان پیش از اسلام:پاورپوینت تاریخچه شهر و شهرنشینی در دوره باستان پیش از اسلام, تاریخچه شهر و شهرنشینی,پروژه,پژوهش,مقاله,جزوه,تحقیق,دانلود پروژه,دانلود پژوهش,دانلود مقاله,دانلود جزوه,دانلود تحقیق

اولویت بندی روش تامین مالی با استفاده از رویکرد ترکیبی AHP- TOPSIS در فروشگاه های زنجیره ای رفاه استان تهران:دانلود پایان نامه,پایان نامه,پایان نامه مدیریت,مدیریت,دانلود پایان نامه مدیریت,تامین مالی,فروشگاه زنجیره ای,تحلیل سلسله مراتب,پروژه,تحقیق,مقاله,پژوهش,دانلود پروژه,دانلود تحقیق,دانلود مقاله,دانلود پژوهش

پاورپوینت شرایط شکایت از وکیل:پاورپوینت شرایط شکایت از وکیل,دانلود پاورپوینت شرایط شکایت از وکیل,پاورپوینت رایگان شرایط شکایت از وکیل,پاورپوینت نحوه شکایت از وکیل,پاورپوینت شرایط شکایت از وکیل چیست,پاورپوینت آشنایی با شرایط شکایت از وکیل,دانلود نحوه شکایت از وکیل,نحوه شکایت از وکیل,پروژه نحوه شکایت از وکیل,تحقیق نحوه شکایت از وکیل,دانلود پاورپوینت نحوه شکایت از وکیل,دانلود پاورپوینت شرایط شکایت از وکیل چیست,دانلود پاورپوینت آشنایی با شرایط شکایت از وکیل,

مبانی نظری اشتیاق کارکنان، اشتیاق شغلی، اشتیاق و رضایت شغلی، اشتیاق شغلی و عملکرد مدیران:مبانی نظری اشتیاق کارکنان، اشتیاق شغلی، اشتیاق و رضایت شغلی، اشتیاق شغلی و عملکرد مدیران,مبانی نظری اشتیاق کارکنان,مبانی نظری اشتیاق و رضایت شغلی، اشتیاق شغلی و عملکرد مدیران,مبانی نظری اشتیاق شغلی و عملکرد مدیران,مبانی نظری ,اشتیاق کارکنان, اشتیاق شغلی, اشتیاق و رضایت شغلی, اشتیاق شغلی , عملکرد مدیران