خرید بررسی اثر عصاره برگ زیتون و ترکیب اصلی آن(اولئوروپئین) بر سمیت سلولی ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین در سلول های PC12

پژوهشگر گرامی،شما با عنوان بررسی اثر عصاره برگ زیتون و ترکیب اصلی آن(اولئوروپئین) بر سمیت سلولی ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین در سلول های PC12 وارد وب سایت شده اید برای دریافت فایل می توانید به ادامه مطلب بروید.
کلمات کلیدی:عصاره برگ زیتون,اولئوروپئین, سمیت سلولی , آپوپتوز, 6هیدروکسی دوپامین,سلولهای PC12,مقاله,پژوهش,تحقیق,پروژه,دانلود مقاله,دانلود پژوهش,دانلود تحقیق,دانلود پروژه

بیماری پارکینسون یک اختلال تخریب کننده نورونی شدید و پیش رونده سیستم عصبی مرکزی است که یکی از شایع ترین اختلالات حرکتی می­باشد. برای اکثر بیماری‌های تخریب کننده عصبی اقدامات موجود حکم مسکن را دارند. به علت اینکه شواهد متعددی پیشنهاد می­کنندکه دربسیاری از بیماری‌های تخریب کننده نورونی مرگ سلولی غیر عادی رخ می­دهد، داروهایی که بتوانند مرگ سلولی را متوقف کنند ممکن است از تخریب نورونی بیشتر جلوگیری کرده و پیشرفت بیماری را آهسته کنند. ترکیبات عمده عصاره برگ زیتون فنول هایی مانند اولئوروپئین می­باشند، که آثار ضد آپوپتوزی از خود نشان می­دهند بنابراین، مطالعه حاضر جهت بررسی اثر عصاره برگ زیتون و اولئوروپئین بر سمیت سلولی ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین بر روی سلول‌های PC12 به عنوان مدل in vitro بیماری پارکینسون طراحی شد. جهت القاء سمیت سلولی، سلول‌های PC12 با 150 میکرومول 6-هیدروکسی دوپامین تیمار شدند. در گروه­های درمانی دوزهای متفاوت برگ زیتون(g/mlμ600-100) واولئوروپئین(g/mlμ25-5) جهت بررسی اثر احتمالی محافظت کننده آنهااستفاده شد. سمیت سلولی توسط تست MTT تعیین شد. میزان ROS داخل سلولی توسط پروب فلورسنس دی­کلرو فلورسین دی استات از طریق روش فلوریمتری ارزیابی شد. قطعات DNA وپارامترهای بیوشیمیایی آپوپتوز (Bax Bcl2 و caspase3) به ترتیب توسط الکتروفورز در ژل آگارز و ایمونوبلاتینگ ارزیابی شدند. نتایج ما نشان دادند که افزایش 6-هیدروکسی دوپامین منجر به افزایش میزان آسیب سلولی، تولید ROS داخل سلولی، فعال شدن کاسپاز3، قطعه­قطعه شدن DNA و همچنین افزایش نسبت Bax/Bcl2 می­گردد. تیمار با عصاره برگ زیتون(μg/ml 400و600) و اولئوروپئین ( μg/ml20و25) اختلالات ذکر شده را کاهش می­دهد. روی هم رفته نتایج پیشنهاد می­کنند که عصاره برگ زیتون و اولئوروپئین در برابر آپوپتوز القاء شده در اثر 6-هیدروکسی دوپامین اثر محافظت کننده نورونی دارند. حداقل بخشی از این اثر محافظت کننده به واسطه کاهش آپوپتوز نورونی اعمال می­گردد و پیشنهاد کننده پتانسیل دارویی عصاره برگ زیتون و اولئوروپئین برای کاهش تخریب عصبی سلول­های دوپامینرژیک می‌باشد.

کلمات کلیدی:عصاره برگ زیتون، 6-هیدروکسی دوپامین، آپوپتوز، سلول­هایPC12، اولئوروپئین.

فهرست مطالب:

فصل اول... 1

1-1 معرفی بیماری پارکینسون. 2

1-2 فاکتورهای دخیل در بیماری پارکینسون. 4

1-2-1 افزایش سن.. 4

1-2-2 فاکتور های محیطی.. 4

1-3 سیستم یوبی کوئیتین پروتئوزوم 16

1-3-1 فاکتورهای ژنتیکی دخیل دربیماری پارکینسون. 17

1-4 التهاب عصبی و بیماری پارکینسون. 21

1-4-1 نقش فعال شدن گلیال ها در بیماری پارکینسون. 22

1-4-2 تغییرات ریز محیط ها در بیماری پارکینسون. 23

1-5 معرفی گیاه زیتون. 23

1-5-1 خصوصیات شیمیایی عصاره برگ زیتون. 24

1-6 اولئوروپئین به عنوان ترکیب اصلی برگ زیتون. 28

فصل دوم.. 30

2-1 مواد و روشها 31

2-1-1 وسایل مورد استفاده. 31

2-1-2 مواد و داروهای مورد استفاده. 31

2-1-3 بافرها و محلولهای مورد استفاده. 32

2-2 جمع آوری برگ زیتون. 34

2-3 تهیه عصاره برگ زیتون. 34

2-4 کشت سلول. 35

2-5 سنجش بقای سلولی. 35

2-5-1 MTT assay 35

2-6 سنجش ROS داخل سلولی. 37

2-6-1 گروه‌های مورد استفاده در تست ROS. 38

2-7 استخراج DNA از سلول‌های PC12 39

2-7-1 گروه‌های مورد آزمایش جهت استخراج DNA 40

2-8 الكتروفورز قطعات DNA.. 41

2-8-1 گروه‌های مورد آزمایش در وسترن بلات... 41

2-8-2 استخراج پروتئین از سلول‌های PC12 42

2-8-3 اندازه گیری کل پروتئین.. 43

2-8-4 بررسی میزان پروتئینهای درگیر در آپوپتوز (Bax Bcl-2 Caspase 3) با استفاده از روش وسترن بلات 44

2-8-5 الکتروفورز پروتئینها روی ژل SDS-PAGE.. 44

2-8-6 انتقال از ژل به کاغذ PVDF. 45

2-8-7 بلاکینگ 46

2-8-8 مرحله شستشو. 46

2-8-9 اضافه کردن آنتی بادی اولیه. 47

2-8-10 اضافه کردن آنتی بادی ثانویه. 47

2-8-11 افزودن سوبسترا و ثبت باندهای نورانی روی فیلم رادیولوژی.. 47

2-8-12 ظهور فیلم.. 48

2-8-13 زدودن آنتی بادیهای متصل به آنتی ژن از روی کاغذ و کنترل لودینگ نمونه ها 48

2-8-14 آنالیز تصاویر گرفته شده از باندهای پروتئینی.. 49

2-9 آنالیز آماری. 49

فصل سوم.. 50

3-1 نتایج. 51

3-1-1 بررسی تأثیرات غلظتهای متفاوت 6-هیدروکسی دوپامین بر بقای سلول‌های PC12. 51

3-1-2 بررسی اثرات دوزهای متفاوت عصاره بر سلول‌های PC12 52

3-1-3 بررسی اثرات دوزهای متفاوت اولئوروپئین بر سلول‌های PC12 53

3-1-4 بررسی اثرات دوزهای متفاوت عصاره برگ زیتون(OLE) بر بقای سلول‌های PC12کشت شده در حضور 6-هیدروکسی دوپامین.. 54

3-1-5 بررسی اثرات دوزهای متفاوت اولئوروپئین بر بقای سلول‌های PC12کشت شده در حضور 6-هیدروکسی دوپامین 55

3-1-6 بررسی اثرات دوزهای موثر عصاره برگ زیتون بر میزان تولید ROS داخل سلولی ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین 56

3-1-7 بررسی اثرات دوزهای موثر اولئوروپئین بر میزان تولید ROS داخل سلولی ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین 57

3-1-8 آنالیز نتایج به دست آمده از وسترن بلات برای پروتئینهای درگیر در آپوپتوز سلولی.. 58

3-1-9 بررسی اثرات عصاره برگ زیتون واولئوروپئین بر قطعه قطعه شدن DNA ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین 63

فصل چهارم.. 64

4-1 بحث و نتیجه گیری. 65

4-2 بروز استرس اکسیدایتو وآپوپتوز در بیماری پارکینسون. 65

4-3 عملکرد کانال های کلسیم و بیماری پارکینسون. 72

4-4 بروز التهاب نورونی در بیماری پارکینسون. 73

4-5 نتیجه گیری کلی. 76

4-6 پیشنهادها 77

فهرست اشکال:

شکل 1- 1:تولید گونه های واکنش پذیر اکسیژن د راثر پارکوات 8

شکل 1- 2: مکانسیم القاء سمیت عصبی توسط 6-هیدروکسی دوپامین.. 13

شکل 3- 1:بررسی اثر غلظت‌های متفاوت 6-هیدروکسی دوپامین بر بقای سلول‌های PC12 با استفاده از تست MTT 51

شکل 3- 2: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت عصاره برگ زیتون بر بقای سلول‌های PC12 با استفاده از تست MTT 52

شکل 3- 3: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت اولئوروپئین بر بقای سلول‌های PC12 با استفاده از تست MTT 53

شکل 3- 4: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت عصاره برگ زیتون بر بقای سلول‌های PC12 در حضور 6-هیدروکسی دوپامین با استفاده از تست MTT. 54

شکل 3- 5: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت اولئوروپئین بر بقای سلول‌های PC12 در حضور 6-هیدروکسی دوپامین با استفاده از تست MTT. 55

شکل 3- 6: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت عصاره برگ زیتون بر میزان ROS تولید شده در حضور 6-هیدروکسی دوپامین 56

شکل 3- 7: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت اولئوروپئین بر میزان ROS تولید شده در حضور 6-هیدروکسی دوپامین 57

شکل 3- 8: بررسی بیان کاسپاز 3 فعال شده در گروه‌های تیمار شده با 6-هیدروکسی دوپامین و عصاره برگ زیتون 59

شکل 3- 9: بررسی بیان کاسپاز 3 فعال شده در گروه‌های تیمار شده با 6-هیدروکسی دوپامین و اولئوروپئین 60

شکل3- 10: بررسی بیان نسبت Bax/Bcl-2 در گروه‌های تیمار شده با 6-هیدروکسی دوپامین و عصاره برگ زیتون 61

شکل3- 11: بررسی نسبت Bax/Bcl-2 در گروه‌های تیمار شده با 6-هیدروکسی دوپامین و اولئوروپئین 62

شکل3- 12:بررسی قطعه قطعه شدن DNA در حالت تیمار با 6-هیدروکسی دوپامین همراه با دوزهای موثر اولئوروپئین و عصاره برگ زیتون. 63

ادامه مطلب و دریافت فایل

پروژه کارآفرینی پرورش زنبور عسل:پروژه کارافرینی پرورش زنبور عسل,طرح توجیهی پرورش زنبور عسل,کارآفرینی پرورش زنبور عسل,دانلود پروژه پرورش زنبور عسل,دانلود کارآفرینی پرورش زنبور عسل,طرح توجیه فنی پرورش زنبور عسل,توجیه اقتصادی پرورش زنبور عسل

پاوپوینت مدیریت:پاوپوینت مدیریت,مدیریت,دانلود مدیریت,دانلود پاوپوینت مدیریت,دانلود,دانلود پاوپوینت,رشته ی مدیریت

پاورپوینت مفهوم پندارگرایی چیست:پاورپوینت مفهوم پندارگرایی چیست,دانلود پاورپوینت مفهوم پندارگرایی چیست,پاورپوینت رایگان مفهوم پندارگرایی چیست,پاورپوینت پندارگرایی چیست,پاورپوینت تعریف پندارگرایی,پاورپوینت پندارگرایی و تربیت,پاورپوینت ایده آلیسم چیست,پاورپوینت تعریف ایده آلیسم چیست,دانلود مفهوم پندارگرایی چیست,مفهوم پندارگرایی چیست ,تحقیق مفهوم پندارگرایی چیست,پروژه مف

مبانی نظری و پیشینه تحقیق درباره شادکامی و نظریه های شادکامی:مبانی نظری و پیشینه تحقیق درباره شادکامی,نظریه های شادکامی,مبانی نظری و پیشینه تحقیق شادکامی,تعریف شادکامی,تاریخچه شادکامی,پیشینه شادکامی,مبانی نظری شادکامی

پاورپوینت بررسی دانشکده معماری:پاورپوینت بررسی دانشکده معماری ,پاورپوینت دانشکده معماری ,پاورپوینت بررسی دانشکده,پاورپوینت دانشکده ,بررسی دانشکده معماری ,دانشکده معماری ,بررسی دانشکده,دانشکده

پاورپوینت جایگاه معماری نیشابور در صدر اسلام:جایگاه معماری نیشابور در صدر اسلام,پاورپوینت جایگاه معماری نیشابور در صدر اسلام,دانلود پاورپوینت جایگاه معماری نیشابور در صدر اسلام,معماری نیشابور در صدر اسلام,پاورپوینت معماری نیشابور در صدر اسلام,دانلود پاورپوینت معماری نیشابور در صدر اسلام,وجه تسمیه نام نیشابور,پاورپوینت وجه تسمیه نام نیشابور,دانلود پاورپوینت وجه تسمیه نام نیشابور,مساج

باستان‌شناسی و هنر اشكانی:باستان‌شناسی و هنر اشكانی,باستان‌شناسی,هنر اشكانی,بررسی باستان‌شناسی,بررسی هنر اشكانی,تحقیق باستان‌شناسی,تحقیق هنر اشكانی,دانلود مقاله باستان‌شناسی و هنر اشكانی,تاریخ فرهنگ و تمدن سلوكی و اشكانی,دانلود تحقیق بررسی باستان‌شناسی و هنر اشكانی,مقاله باستان‌شناسی,مقاله هنر اشكانی,تاریخ فرهنگ و تمدن,پروژه,پژوهش,مقاله,جزوه,تحقیق,دانلود

مبانی نظری و پیشینه تحقیق درباره اعتیاد به اینترنت و فیسبوک:مبانی نظری و پیشینه تحقیق اعتیاد به اینترنت و فیس بوک,فیس بوک,اینترنت,اعتیاد به اینترنت,مبانی نظری و پیشینه تحقیق درباره اعتیاد به اینترنت,مبانی نظری و پیشینه تحقیق اعتیاد به اینترنت

پاورپوینت چیدمان فضا:دانلود پاورپوینت چیدمان فضا,چیدمان فضا,پاورپوینت تکنیک های چیدمان فضا,چیدمان فضای شهری,پاورپوینت آشنایی با چیدمان فضای شهری,پاورپوینت چیدمان فضای شهری,تکنیک های چیدمان فضا,زمینه های نظری تئوری چیدمان فضا,پاورپوینت چیدمان فضا

دانلود مقاله انواع ترانزیستور:انواع ترانزیستور,مقاله انواع ترانزیستور,دانلود مقاله انواع ترانزیستور,تحقیق انواع ترانزیستور,دانلود تحقیق انواع ترانزیستور,پروژه انواع ترانزیستور,دانلود پروژه انواع ترانزیستور,پروژه,مقاله,تحقیق,پروژه دانشجویی,دانلود پروژه,دانلود مقاله,دانلود تحقیق,دانلود پروژه دانشجویی